轉(zhuǎn)：跑好薄層板的方法

這樣的資料不少，中國藥典附錄就說的很詳細(xì)！不過要真的跑好薄層板還真不是容易的，當(dāng)然我說的是各個都跑的好的話。

1、薄層板，這個我用過預(yù)制板也自己鋪過。薄層板如果是商品板一般比較好，都比較薄，平整，就是載樣量太小，如果碰上點樣量大的，還是自己鋪的好，薄層板比較厚，載樣量大，如果有點10-20ul的，就看出不同來了。
       但是自己鋪的板也有缺點就是如果鋪的厚了，不如商品板靈敏，如果遇到淺顏色的點特別是淺黃-黃顏色上紫外燈的點，我碰到一次商品板陽性而自己鋪的陰性了，就是自己鋪的太厚的緣故。
另外現(xiàn)在因為商品板質(zhì)量比較好例如墨克的，國內(nèi)的青島海洋的，我們都用商品板了。如果要薄層掃描，還是買好的板使用。
如果用到NaOH板之類的，用溶劑浸泡一下晾干就行。
另外活化什么的看一下藥典附錄比較權(quán)威的哈。

2、點樣 一般藥品標(biāo)準(zhǔn)中都有點樣了的規(guī)定有的是限度有的是固定的體積。用毛細(xì)管現(xiàn)在很少用的都用，微量進樣器。當(dāng)然做含量也有自動點樣儀器。我們常用手動點樣，點樣的點按照藥典的要求直徑大小*好了，我看很多化驗人員都是想點的越小越好，我看未必，如果都點于一點，往往點樣量一大，薄層板就載不了了，導(dǎo)致點不成圓形，也影響展開。我看要根據(jù)情況定，點的多少和斑點大小成正比。當(dāng)然也有點成條狀的，另說了。我一般點的直徑也就1mm上下。

另外現(xiàn)在的標(biāo)準(zhǔn)有些做的很不好或者各個企業(yè)的產(chǎn)品生產(chǎn)工藝不一樣吧，特別是中成藥往往按照標(biāo)準(zhǔn)操作，提取出來的供試品，用規(guī)定的體積1ml2m等一溶解，黏糊糊的，根本沒有辦法點樣，薄層板根本不吸附，這樣我常常按照標(biāo)準(zhǔn)稀釋一倍或2倍，點樣量也隨之倍數(shù)增加。這樣供試品溶液稀釋后，有利用點樣。
另外要說的，就是點樣量不是越大越容易出清晰的點，有些點樣量大往往出現(xiàn)拖尾，背景模糊，反而看不清了。我的經(jīng)驗是往往根據(jù)標(biāo)準(zhǔn) 上 下點三個點，放在一起，一起參照看，比較容易判斷準(zhǔn)確！
當(dāng)然薄層掃描的要嚴(yán)格按照規(guī)定，這個方法一般還行，就是供試品精制除雜做好了，一般展開背景就清晰容易分離。

3、展開劑：這個是*重要的，我常?？吹揭驗檎归_劑配制不好的，而呈陰性的。展開劑配制要認(rèn)真，混勻。如果低溫冷藏的要按照規(guī)定冷藏。

4、展開方式：我用過立式展開和臥式展開，*好的就是立式展開，展開時溶劑前沿一般平。我常用雙槽立式磨砂玻璃的展開缸。展開劑放入后，先飽和后放入點樣好的薄層板，注意不好讓展開劑泡了點樣點，或距離太近。一般距離點樣點有個2-3mm的距離就比較好。放入薄層板時一定要與展開劑液面平行放入，薄層板兩側(cè)也不要碰兩側(cè)的展開缸，要不然要出現(xiàn)邊緣效應(yīng)！
5、噴板：我有時做浸板，因為這樣不嗆人。但*好還是噴板，現(xiàn)在都使用自動噴霧器，噴霧效果好。噴霧一定要均勻，量要足，特別是對做含量掃描的，尤其是。如使用玻璃噴瓶，*好買個皮老虎，噴瓶距離薄層板要遠(yuǎn)，只有那樣噴霧霧滴小效果好。
6、顯色。噴霧完成后，一般要顯色，如果顯色裝置當(dāng)然*好，如果是烘箱一定要把玻璃板；立起來或兩側(cè)墊起來，如直接房子鐵板上，玻璃板與之直接接觸恐怕顯色不均勻，尤其要上掃描含量測定的。另外顯色一定要完全，一般以顯色斑點清晰鮮艷。特別是硫酸乙醇顯色的，如果顯色不完全，有些點不出來或不完全，影響含量大小。如果烘過了，背景黑了，顯色斑點也變色，如果上薄層掃描就峰面積小，影響含量了。